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一般水对于生物细胞来说是比较重要一个部分，占总细胞的百分之九十，在零摄氏度下会结冰的，样品的温度也是降的。会有结冰的份量。胞内的水分会有很多往外渗透，这样细胞会收缩，会有损伤的。各方面都会有损伤。
另一方面，在冷却速度是很快，还有在微生物的温度相对冷 冻后是十分重要的，是通过保护剂的方法会有冷 冻损伤的，需要把冷冻的微生物样品低温冷冻与冰晶的减少所形成的。比如我们常看到的甘油与可溶性淀粉这样的保护剂。
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